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了解质粒慢提的大侠进来帮忙下吧

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楼主
lxbry 发表于 06-11-4 16:56:47 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
做SDS缄裂解法提质粒时,量很少.情况是这样的:
加一液后强力震荡了,应该没问题.
加二液后上下颠倒了五次左右,且开EP管<是在EP管中进行 的>时开盖口有看到连丝.但在配SDS时是现配的,然后再和NAOH混.
三液加后也立即出现沉淀.
之后加的 东西都没问题了,
奇怪的是加完无水乙醇静置半个小时后离心,没发现有质粒沉淀,只有一个有<那时也有怀疑是不是杂质>,很是郁闷
继续
加完75%乙醇后,自暴自弃又离心了一回,居然有几个出现沉淀,更让人郁闷了.
之后就按流程来,直到电泳,十一个样品只 有7个有需要的条带,之前无水乙醇离心就出现沉淀的很明显有亮带.
谁能给点意见啊,很郁闷周末都过不好[s:8]
沙发
kkzhu 发表于 07-1-27 14:45:34 | 只看该作者
无水乙醇无需沉淀半小时,直接离心就好
另外建议把裂解液用别人的和自己的做一下对照,看是不是裂解液的问题
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