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常用的细胞计数方法有哪些?

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ainidely 发表于 15-9-9 10:38:11 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
浙大复试竟然遇到这么专业性的问题,从网上搜了一下,

计数室
计数室,又叫做血细胞计数器,是一种专门设计用于细胞计数的显微镜载玻片。在载玻片的中间有一处凹陷,而此凹陷处又用网格进行了刻印。一滴细胞培养液会被滴到凹陷处。然后在显微镜下对样本进行观察。研究人员利用网格人工地对特定范围的细胞数量进行统计。由于凹陷处的深度是已经知道的了,那么我们就可以得到被检测的培养液的量,继而得到细胞的浓度。
计数室经常用于对临床血细胞进行计数。它的主要优势就在于既便宜又比较快速,而对一些效率高的生物实验中的细胞培养效果进行检测时,这些特性也使得它成为比较理想的选择。通常情况下,我们需要对培养液进行稀释,否则是不可能得到高浓度细胞数量的。而进行浓度稀释往往会增加检测结果的不准确性,这也是这种细胞计数方法的不足之处。
平板菌落计数法
这种方法就是将细胞轻轻地涂到含有培养基的培养皿上来对培养细胞的数量进行统计。如果细胞高效地分布到平板上,那每一个细胞将会生产一个单独的细胞菌落单位(CFU)。而这个时候,我们就可以对这些细胞群菌落进行统计了,然后结合已知用于涂布的培养液量,我们就可以得到细胞的浓度了。
就像计数室那样,培养基也需要进行充分地被稀释才能使用,否则形成的将不是单个细胞菌落,而是一整个平布在培养皿上大菌斑。这个时候的克隆菌落早已互相重叠在一起了。另外,这种平板计数方法是最慢的一种细胞计数方法,大部分微生物需要至少12小时才能形成可见的菌落。
虽然这种方法比较耗时间,但是通过这种方法,我们可以得到活细胞的精确数量,因为只有活的细胞才可以长成菌落。因此它被广泛用于需要统计细胞数量的试验中,这些实验中的细胞处在抗药或其他外部刺激的条件下。另外,在对琼脂平板上的菌落进行计数时,使用菌落计数器可以提供极大的便利。

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