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请问大家两道题,大学帮帮忙

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楼主
sfcy1996 发表于 08-1-12 16:43:19 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
1。生化实验中,在测定某些物质的含量时,经常先要做标准曲线时,这是为什么?制作标准曲线要注意哪些事项?
2。拟用重组技术在大肠菌或动物细胞中表达蛋白质A,试做出开展此项课题的实验计划。


谢谢,哪位大哥能给解决一下
沙发
xuhzi 发表于 08-1-13 17:18:01 | 只看该作者
1,跟数学中应用图上曲线,对已经知道X坐标,求Y坐标的道理一样。作图要求:选择适当的X,Y轴代表的含义,比如蛋白质含量测定可以用吸光度-蛋白质浓度坐标系;选择合适的X,Y轴上的点的间距和梯度,使要测的点在合适位置,最好不要在延长线上或靠近原点和轴的位置,也不要使间距太大,在图上画不下;一般选择7点以上做图,越多越精确,连线时,舍弃远离曲线的点,使不在曲线上的点均匀的分布与曲线两边,曲线尽可能的光滑。标准曲线法好处在于比直接法精确,缺点是增加测样工作量,比较烦琐。现在实验的新设备都与计算机相连,所以不用手工绘制,电脑处理打印出即可。
2,参阅DNA重组技术,注意真核和原核表达载体是不同的。基本步骤为,获得目的基因DNA(真核的可以用CDNA反转录),构建载体,扩增,筛选表达目的基因的重组体。
板凳
花仙子2008 发表于 08-1-16 21:41:49 | 只看该作者
拟用重组技术在大肠菌或动物细胞中表达蛋白质A,试做出开展此项课题的实验计划。

这是说的是蛋白A--------不是非特定的蛋白质,要结合其特征,而不是泛泛回答基因工程的原理。蛋白A是用于亲和层析单克隆抗体(多为鼠源单克隆抗体)的配体,这里反其道而行之。所以在基因工程方法(写出基因工程的一般流程)是大肠菌或动物细胞表达出蛋白A后,还要破碎细胞后,粗分离后,用鼠源单克隆抗体构建的亲和层析将蛋白A有效的分离提纯出来。这是一个上游和下游如何协调的综合问题,不是简单地列上基因工程的原理就完事了,在实际科研中这个课题也是考虑上游和下游如何协调的综合实验问题。

[ 本帖最后由 花仙子2008 于 2008-1-16 21:44 编辑 ]
地板
小裴2007 发表于 08-1-17 23:05:40 | 只看该作者
还要写明要哪位大哥回答你,那么女生就不该回答你。
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