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DNA 复制百分数

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花仙子2008 发表于 08-3-21 18:16:11 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
DNA 复制百分数
        正常的DNA超螺旋密度为-0.05,在无拓扑异构酶条件下当复制到超螺旋密度
为0.07时,由于超螺旋的阻力不能继续复制,求此时的复制百分数。(1999年北大硕士入学生化试题)
解:首先要注意DNA超螺旋均是指cccDNA(共价闭合环状dsDNA),线状DNA也有超螺旋,但在体外研究时无法观测具体的稳定数据,所以不研究!
                参考:沈同、王镜岩主编,生物化学(下),高等教育出版社,1991,P338。
                超螺旋密度σ=(α-β)/β,α是双链闭环中两条strand的互绕数,β为DNA螺旋圈数,[特别要注意]只要双链闭环DNA不发生断裂,α值不变;β值只对DNA的碱基对数目和构象有关,而在溶液中稳定的结构就是B-DNA(普通生化就如此假定,实际上略有差异[注意]B-DNA指ssDNA的二级结构,与三级结构无关,与α无关,无论双链环DNA怎么转动/扭动,就二级结构而言稳定后永远是B-DNA!)。β值就是B-DNA中的配对的碱基对数X10,那么也就是说:只要能够知道,已经复制的碱基对数,已复制的碱基对%=1-β2/β1。③因为已复制的两条ssDNA母链与各自的子链分别配对,而不再互相配对,因此作为cccDNA其参与复制的碱基对的β就没有了。剩下的计算非常容易了。⑴在天然状态下:σ1=-0.05,β1为此时的DNA螺旋圈数,α为此时的闭环中双链互绕数,于是有:σ1=(α-β1)/β1→ -0.05=(α-β1)/β1 …。⑵无拓扑异构酶,复制终止时,σ2=0.07,β2为此时的DNA螺旋圈数,α为此时的闭环双链互绕数(不变)于是有:σ2=(α-β2)/β2→ 0.07=(α-β2)/β2…。联系①、②,求出β1=α/0.95,β2=α/1.07。代入③式即有已复制的碱基对%=复制百分数=(1-0.95/1.07)*100%=11.21% 。(2002.1.7)
                ⑴[注释] B-DNA是一种能量上的稳定结构,螺旋数(β)的减少就使其转变为一种受力状态。分子所经受的张力可以按两种方式分布,一种方式是分子保留一单链区,其余部分仍保持B-DNA状态:另一种方式是形式超螺旋,超螺旋的形成已放松的螺旋的碱基对接近于B-DNA中的状态!
----阎隆飞、张玉麟主编,分子生物学,中国农业大学出版社,1997年,第二版,P84。
沙发
 楼主| 花仙子2008 发表于 08-3-21 18:18:50 | 只看该作者
这题我以前发在www.bioon.com
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